现在人们对于生活饮用水的水质要求逐渐提高，水资源的污染问题也成为关注焦点。为预防水中微生物对人体健康造成威胁，我国会对生活饮用水进行严格的检验检测，其中水中总大肠菌群的检测是非常重要的一项。

　　饮用水中的总大肠菌群主要是指大肠杆菌、大肠菌群和粪大肠菌群三大类型细菌共同组成的大肠菌群。水中大肠菌群数的多少，表明水体被粪便污染的程度，并间接表明肠道致病菌存在可能性的大小，因此，总大肠菌群是评价饮用水水质的重要指标。目前实验室常用的水中总大肠菌群检测方法主要有多管发酵法、滤膜法、酶底物法等，下面BBIN宝盈集团仪器结合实际工作经验对三种方法进行简单的分析。

实验室水中总大肠菌群三种检测方法比较分析

方法一：滤膜法

　　滤膜法是用孔径为0.45微米的微孔滤膜过滤水样，将滤膜贴在添加乳糖的选择性培养基上，然后在37℃的环境下培养24小时，培养基上能形成需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽孢杆菌，计算滤膜上生长的总大肠菌群数，以100ml水样中总大肠菌群数作为报告结果。

　　滤膜法选择的检测培养基一般有m-Endo型培养基和Tergitol-TTC型培养基两种，前者可在培养基上形成带有金属光泽的红色菌落，后者可形成橙黄色的菌落。

滤膜法优点：可定量计数，无干扰因素下的准确性较高。

滤膜法缺点：对于在处理工程中因为化学和物理因素引起的大肠菌群非致死性损伤，无法在培养基上形成菌落;实验周期长，通常需要2到3天;特异性不高，结果易受水样中其他细菌的影响，假阳性高，需要进一步实验验证。

方法二、多管发酵法

　　多管发酵法是将水样进行10倍稀释，然后分别接种到乳糖蛋白胨培养液中，在35℃的环境中培养48小时，观察细菌的生长情况。将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美篮琼脂平板上，进行分离培养，并通过革兰染色、镜检等步骤进行验证试验。结果通过MPN检索表即可查到100ml水样中总大肠菌群的可能数值。

多管发酵法优点：适用于检测大面积的水样;实验方法成本较低;对操作人员专业素养要求不高，经过微生物学基本培训的技术人员即可操作;可检测浊度较大的水样。

多管发酵法缺点：若存在非大肠菌群细菌的干扰，无法准确定量;实验周期较长，通常需要96小时以上;通过MPN表检索并计算得出大概的实验结果，可能造成漏检，精确性一般。

方法三：酶底物法

　　酶底物法是今年刚写入国标的水质大肠菌群检测方法，其具体操作步骤如下：

　　用100ml定量瓶量取100ml水样(若水样污染严重时可进行稀释)，加入专用的酶底物检测试剂，盖上瓶盖，轻轻摇晃均匀使其溶解。将混合均匀的溶液倒入定量孔板中，然后放进程控定量封口机进行随机分配和加热封口。将封过口的定量孔板放在培养箱中，温度设定为36℃，培养24小时。培养完成后，孔格显示为黄色即为阳性，无色或显色明显浅于阳性色盘的为阴性，计算黄色孔格数并查询对照51MPN表或97MPN表，结果即为100ml水样中大肠菌群的含量，若水样进行稀释，表格结果乘上稀释倍数即为实验结果。

酶底物法100ml水样定量瓶

酶底物法定量检测孔板

酶底物法优点：检测范围大，100ml水样中可检出1-2419个目标;可精确检出100ml水样中的单个细菌，假阴性低;酶底物试剂可抑制上百万个异养细菌，假阳性低;准确性高，无需验证实验;实验周期短，时间不超过24小时;操作简单，培训一次就能轻松使用;适用于大量样品的批量快速检测。

酶底物法缺点：需要购买程控定量封口机和酶底物试剂，相对来说成本稍微高一些。

　　以上就是对滤膜法、多管发酵法、酶底物法检测水中总大肠菌群的简单介绍和比较分析，从中可以看出的是，酶底物法作为国标中新推出的检测方法，有着较多的优势，除了能满足基本的实验要求外，也减少了实验时间，能应对突发的事件，弥补了早前两种方法的不足，这里BBIN宝盈集团仪器建议有条件的实验室配置使用。